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谷氨酸脫羧酶自身抗體ELISA試劑盒實驗是目前應用廣酶免疫學技術(shù)方法
更新時間:2019-01-11   點擊次數(shù):1101次
  谷氨酸脫羧酶自身抗體ELISA試劑盒是將抗原的特異性反應與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。在測定中一般要準備合理的計劃準備好試劑,ELISA試劑盒在使用前與室溫平衡,在溫育反應步驟中,能使反應微孔內(nèi)的溫度能較快地達到所要求的高度,以滿足測定要求。滿足于生物化學、分子生物學 、細胞生物學、免疫學等生物實驗需求,不用于臨床診斷。
  谷氨酸脫羧酶自身抗體ELISA試劑盒實驗操作簡單、快速、敏感性高、能定性及半微量、微量、超微量定量分析,是目前應用廣酶免疫學技術(shù)方法。
  谷氨酸脫羧酶自身抗體ELISA試劑盒標本:血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
  1)血清:
  室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
  2)血漿:
  應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。
  仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
  3)尿液:
  用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
  4)細胞培養(yǎng)上清:
  A、檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/ 分)。仔細收集上清。
  B、檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并 放出細胞內(nèi)成份。
  離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
  5)組織標本:
  切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。
  加入一定量的 PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3087轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
  谷氨酸脫羧酶自身抗體ELISA試劑盒使用注意事項:
  1.ELISA試劑盒檢測前,檢查各種儀器,打開酶標儀,穩(wěn)定20分鐘左右。
  2.檢測樣本要澄清,不能含雜物,否則會直接影響結(jié)果。
  3.實驗開始前要將試劑盒取出,室溫放置30-40分鐘,使各種試劑都恢復到室溫,以使檢測結(jié)果更為穩(wěn)定。
  4.盡量做雙標準實驗,這樣可以保證數(shù)據(jù)的準確性。
  5.底物具有毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,要避免接觸。
  6.谷氨酸脫羧酶自身抗體ELISA試劑盒實驗中,要使底物避光保存,酶標板均可拆卸,多余的部分應密封好,低溫保存。
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