IA-2抗體檢測試劑盒檢驗(yàn)方法
更新時(shí)間:2018-02-05 點(diǎn)擊次數(shù):1131次
IA-2抗體檢測試劑盒原理:
IA-2抗體檢測試劑盒是采用豬瘟抗原包被微孔板,在試驗(yàn)中,加入稀釋的對照血清和待檢血清,經(jīng)溫育后,若樣品中含有抗豬瘟病毒的特異性抗體,則將與檢測板上抗原結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后;再加入酶標(biāo)二抗,與檢測板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合;再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,在孔中加TMB底物液,與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物,加入HF溶液終止反應(yīng)后,用酶標(biāo)儀630nm波長測定各反應(yīng)孔中的OD值。
IA-2抗體檢測試劑盒檢驗(yàn)方法:
1. 配液: 用蒸餾水或去離子水將1瓶濃縮洗滌液全部稀釋至450ml。
2. 編號: 將樣本對應(yīng)的微孔按序編號,每板設(shè)陰性對照3孔、陽性對照2孔和空白孔1孔(雙波長測定可不設(shè)空白孔)。
3. 加樣: 每孔加100μl(或2滴)樣本稀釋液,空白孔不加。分別在相應(yīng)的孔中加入樣本或陰、陽對照10μl,輕輕振蕩混勻。
4. 溫育: 用封板膜封板后放入37±1℃溫箱溫育45±1分鐘。
5. 洗滌: 小心揭掉封板膜,用洗板機(jī)洗滌5次(也可手工洗板),每次浸泡30秒,洗滌時(shí)各孔均需加滿洗滌液,zui后一次在吸水紙上盡量拍干。
6. 加酶: 搖勻后每孔加100μl(或2滴)酶結(jié)合物,空白孔不加,輕輕振蕩混勻。
7. 溫育: 用另一張封板膜封板后放入37±1℃溫箱溫育30±1分鐘。
8. 洗滌: 操作同第5步。
9. 顯色: 每孔先加50μl(或1滴)顯色劑A,然后加50μl(或1滴)顯色劑B(包括空白孔),37±1℃避光顯色10±1分鐘。
10.測定: 每孔加50μl(或1滴)終止液終止反應(yīng),輕輕振蕩混勻,10分鐘內(nèi)在波長450nm下分別測定各孔的吸光值A(chǔ)值。(單波長酶標(biāo)儀需空白孔調(diào)零,雙波長酶標(biāo)儀不需空白孔調(diào)零)。
IA-2抗體檢測試劑盒預(yù)期用途:本試劑盒用于檢測待測血清或血漿樣品中可能存在的結(jié)核分枝桿菌IgG抗體。在臨床診斷中作為結(jié)核分枝桿菌感染的輔助診斷。結(jié)核分枝桿菌(MTB)是結(jié)核病的致病菌,屬分枝桿菌屬,是一種特殊的圓桿狀細(xì)菌,細(xì)胞壁富含脂類,抗酸染色,又叫抗酸桿菌。MTB的宿主是人,主要通過結(jié)核病人含有該細(xì)菌的氣溶膠(aerosol)進(jìn)行傳播。人體除毛發(fā)外幾乎全身所有組織都可以感染結(jié)核病,如腸結(jié)核、骨結(jié)核、淋巴結(jié)核等。