通訊作者：劉寬芝
作者單位：河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院
RSRTJ翻譯，僅供學(xué)習(xí)參考
1型糖尿病（T1D）是一種器官特異性自身免疫性疾病，與針對胰腺β細(xì)胞的自身免疫反應(yīng)有關(guān)。檢測針對胰腺β細(xì)胞抗原的自身抗體有助于輔助診斷 T1D，如谷氨酸脫羧酶抗體（GADA）、抗胰島素自身抗體（IAA）、蛋白酪氨酸磷酸酶抗體（IA-2A）和鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 8 (ZnT8) 抗體。在 T1D 的常規(guī)診斷過程中加入 ZnT8A檢測會(huì)提高整體自身抗體的檢出率[2]。然而，ZnT8A的檢測在中國醫(yī)學(xué)領(lǐng)域并不常見。本研究使用易于實(shí)施且應(yīng)用方便的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) (ELISA) 對ZnT8A進(jìn)行檢測，旨在評(píng)估ZnT8A在中國人群 T1D診斷中的應(yīng)用價(jià)值。
患者招募（2014年1月至2016年4月）
抗體檢測
ELISA法檢測ZnT8A
本研究中，ZnT8A單項(xiàng)標(biāo)志物對診斷 T1D 的靈敏度為25.3%，特異性為99.6%（臨界值15 U/ml）。通過 ELISA 檢測 ZnT8A 的 ROC曲線如圖1所示。曲線下面積（AUC）0.892（95% CI 0.853~0.930）表明該測試具有較高的準(zhǔn)確性。
糖尿病抗體標(biāo)準(zhǔn)化計(jì)劃(IASP)通過放射配體法檢測ZnT8A，得到的 ROC-AUC 中位數(shù)為 0.848 [25]。Dunseath等[13] 在 1 型糖尿病患者和健康獻(xiàn)血者中通過 ELISA 對 ZnT8A 進(jìn)行 ROC 曲線分析，結(jié)果顯示 AUC 為 0.80，靈敏度為 54%，特異性為 99%。
因此，我們推測ELISA的ZnT8A測試可能具有較高的準(zhǔn)確性。此外，ELISA檢測ZnT8A作為一種簡便、可重復(fù)的方法，具有高度的特異性，可能適合更廣泛的臨床應(yīng)用。
圖 1 用于1型糖尿病的ZnT8抗體篩查試驗(yàn)的ROC曲線。
ZnT8A檢測結(jié)果
1. 糖尿病患者及健康對照組的ZnT8A檢測結(jié)果
T1D患者的ZnT8A水平高于T2D患者和健康對照組。
2. T1D患者不同亞型的ZnT8A檢測結(jié)果
“經(jīng)典" 1 型糖尿病患者中 ZnT8A 的陽性檢出率高于LADA患者（45.0 vs. 18.7%，p < 0.05）。與之前報(bào)道的文獻(xiàn)一致[19]?！敖?jīng)典" 1 型糖尿病患者的 ZnT8A 水平高于 LADA 患者（中位數(shù) 14.00 vs, 13.42，Z =- 2.013，p = 0.044）。
ZnT8A檢出率的影響因素
1. 年齡
Lampasona [20] 報(bào)道，在 GADA 和/或 IA-2A 陽性的自身免疫年輕患者中 ZnT8A 陽性的檢出率較高，并且隨著年齡的增長而下降：在 0-49歲的受試者中陽性率為 12.2%；而在 49.1-58.8歲受試者中降至 6.6%；年齡> 58.9 歲的受試者中陽性率僅 4.4%。我們發(fā)現(xiàn) ZnT8A 在 18 歲以下的T1D患者中的陽性檢出率和抗體水平均最高，其余為 18-40 歲T1D患者和 40 歲以上T1D患者（p < 0.05）。后兩者在ZnT8A 陽性率和 抗體水平上無顯著差異。這與 Vaziri-Sani 等人先前發(fā)表的報(bào)告一致，他們發(fā)現(xiàn)2~17歲T1D患者的ZnT8A 水平顯著高于15~34歲T1D患者。
另一項(xiàng)針對 15 歲以下新診斷為糖尿病的兒童和青少年的研究報(bào)告稱，ZnT8A 陽性檢出率與年齡較大有關(guān) [22]。據(jù)報(bào)道，在中國和比利時(shí)的 T1D 患者中，ZnT8A 的檢出率隨著診斷年齡的增加而下降 [17, 23]。此外，在 T1D 發(fā)病后 6 個(gè)月內(nèi)，法國6-10 歲兒童的 ZnT8A 檢出率高于其他年齡較大的患者 [5]。本研究中，ZnT8A 陽性組的診斷年齡小于 ZnT8A 陰性組。然而，ZnT8A 檢出率隨著發(fā)病年齡的增長而增加，在 8-16 歲時(shí)達(dá)到一個(gè)平臺(tái)，然后下降 [24]。綜上所述，診斷年齡可能在 ZnT8A 檢出率中起重要作用。
本研究ZnT8抗體的陽性率和抗體水平：
2. 地理、種族差異和疾病診斷標(biāo)準(zhǔn)
作為一種新型的β細(xì)胞特異性自身抗體，ZnT8A在T1D的篩選中具有廣泛的臨床應(yīng)用價(jià)值[12]。ZnT8A 在全球T1D患者中的陽性率差異大（如下表）。LADA 患者中 ZnT8A 的不同檢出率可能是受地理、種族差異和疾病診斷標(biāo)準(zhǔn)不同影響。在中國，LADA的診斷需要T1D的起病年齡≥18歲，而其他地區(qū)LADA的診斷通常需要T1D起病年齡≥30歲。本研究招募的 75% 的 T1D患者是 LADA 患者，“經(jīng)典" T1D患者的比例非常小，可能會(huì)影響一些結(jié)果，例如 T1D患者中 ZnT8A 的檢出率。
楊等人 [17] 發(fā)現(xiàn)糖尿病病程與受試者 ZnT8A 的檢出率沒有差異。本研究中 ZnT8A+ 和 ZnT8A- 的T1D患者的病程沒有差異。也有不同結(jié)果的報(bào)道稱：61% 的新發(fā)病的T1D患者 ZnT8A 呈陽性，而6 個(gè)月以上病程的 T1D 患者中ZnT8A檢出率降至 33%[5]。由于 ZnT8A 水平從 T1D 的臨床發(fā)病后呈指數(shù)級(jí)下降，本研究中 ZnT8A 的低檢出率可能是由于納入了病程較長的 T1D 患者。糖尿病病程與 ZnT8A 檢出率之間的相關(guān)性值得進(jìn)一步探索。同時(shí)，還需要一些縱向研究來動(dòng)態(tài)監(jiān)測中國 T1D 患者的 ZnT8A 水平。
ZnT8A與臨床體征：
Mbanya等人[28] 表明 ZnT8A 陽性糖尿病患者的 BMI 明顯低于 ZnT8A 陰性患者。在本研究中同樣觀察到了類似的趨勢，支持了更瘦的糖尿病患者可能更容易檢測出ZnT8A 的觀點(diǎn)。
ZnT8 具有高度β細(xì)胞特異性，ZnT8A引起的自身免疫損傷可能導(dǎo)致嚴(yán)重的胰島素缺乏。芬蘭的一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，與 ZnT8A 陰性的同齡人相比，ZnT8A 陽性兒童的血清 C 肽濃度較低，胰島素治療劑量較高，并且更容易發(fā)生酮癥酸中毒 [22]。本研究中也發(fā)現(xiàn)了相同的趨勢。因此，ZnT8A 陽性可能反映了一種侵襲性更強(qiáng)的T1D。
與 ZnT8A 陰性的T1D患者相比，ZnT8A 陽性 的T1D患者診斷時(shí)年齡較小 (p = 0.022)，BMI 較低 (p = 0.016)，酮癥酸中毒更頻繁 (p = 0.034)，更高的胰島素治療需求 (p = 0.041)。但兩組的糖尿病病程、FBG、HbA1c 和血脂（膽固醇、甘油三酯、LDL-C 和 HDL-C）水平無顯著差異。這一發(fā)現(xiàn)與 Mbanya 等人[28]和中國的另一項(xiàng)研究報(bào)告[17]的結(jié)論一致。
T1D 患者的病史、體征、代謝特征：
ZnT8A與GADA之間的關(guān)系：
T1D患者抗體檢測結(jié)果：
ZnT8A 作為 T1D 的一個(gè)額外且獨(dú)立的預(yù)測標(biāo)志物，在GADA、IA-2A、IAA 和 ICA均陰性的 T1D患者中的陽性檢出率為26% [26]。此外，據(jù)報(bào)道，臨床表型為 T2D 的患者中 ZnT8A 的陽性檢出率為 1.99%，ZnT8A 檢測可提高基于 GADA 和 IA-2A 陽性 LADA 的診斷檢出率[27]。因此，ZnT8A檢測可用于鑒別區(qū)分 LADA 和青年發(fā)病的T2D ，有助于 LADA 患者的精確診斷和早期胰島素治療方案的抉擇。ZnT8A 水平與 GADA 水平相關(guān)（相關(guān)系數(shù) = 0.447，p = 0.000）。ZnT8A 和 GADA 的組合將診斷靈敏度從 56.8%（GADA 陽性）提高到 64.2%。目前GADA 測試在中國基本已經(jīng)普及，我們建議應(yīng)盡快引入 ZnT8A檢測。此外，之前有報(bào)道稱 ZnT8A 與高 GADA 滴度相關(guān) [20]。我們發(fā)現(xiàn) ZnT8A 水平與 GADA 水平相關(guān)。
總結(jié)：
ZnT8A檢測對于T1D和LADA患者的篩查具有重要的價(jià)值，該抗體的補(bǔ)充對于提高抗體檢出率具有重要價(jià)值。ELISA檢測ZnT8A作為一種簡便易行的方法，可信度高，在T1D診斷中具有廣泛的臨床應(yīng)用潛力。
原文文獻(xiàn)：Qiu X , Ning C , Xiao L , et al. Zinc transporter 8 autoantibody (ZnT8A) by ELISA for diagnosing type 1 diabetes among Chinese people[J]. International Journal of Diabetes in Developing Countries, 2018.
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