淺析糖尿病抗體ELISA檢測試劑盒測試原理
更新時間:2021-10-19 點擊次數(shù):740次
糖尿病的發(fā)病機理包括胰島素的絕對或相對缺乏,前者是1型糖尿病的特征,但多數(shù)2型糖尿病患者或早或晚也會進入胰島素絕對缺乏階段,且近年來2型糖尿病有發(fā)病年輕化的趨勢,故兩型糖尿病診斷和鑒別診斷逐漸成為臨床較為困惑的問題。其中1型糖尿病主要由于胰島β細胞自身免疫破壞引起,外周血中出現(xiàn)的針對胰島β細胞相關分子的自身抗體作為免疫學檢測指標,能夠為1型糖尿病的分型診斷提供實驗室證據(jù)。由于不同自身抗體各具特點,單個指標檢測的敏感性和特異性各有缺陷,因此目前常采用多種自身抗體聯(lián)合檢測。
糖尿病抗體ELISA檢測試劑盒包括盒體及與盒體連接的盒蓋,還包括試劑瓶和反應板,盒體內(nèi)設有用于固定試劑瓶和反應板的固定件,試劑瓶包括裝有緩沖液的試劑瓶I及裝有膠體金標記物的試劑瓶Ⅱ,反應板包括板體及設有糖尿病自身免疫相關抗原固定區(qū)的抗原膜,抗原膜固定在板體中并且暴露出糖尿病自身免疫相關抗原固定區(qū);糖尿病自身抗體免疫滲濾聯(lián)檢試劑盒,試劑瓶內(nèi)試劑、反應板與人體血清的配合操作能夠利用斑點金免疫滲濾法在同一條件下同時檢測多種糖尿病自身抗體,其檢測靈敏度高、操作簡便、檢測速度快、無需輔助儀器設備:降低了檢測成本,適于推廣應用。
糖尿病抗體ELISA檢測試劑盒原理:將待測物質(zhì)抗原(GADA、IAA、IA-2A、ICA和ZnT-8A)轉(zhuǎn)移到硝酸纖維膜上,封閉后,加入已稀釋的患者血清或血漿,孵育,血清中的特異性抗體將與膜上的抗原結(jié)合,洗滌,加入用辣根過氧化物酶(HRP)標記的抗人IgG(酶聯(lián)物),孵育,洗滌,加入TMB底物,產(chǎn)生藍色條帶(加入終止液后轉(zhuǎn)為棕色),將顯色情況與判讀卡比較即可判斷血清中是否存在特異性抗體。