AChRAb試劑盒操作時(shí)注意事項(xiàng)
更新時(shí)間:2021-09-26 點(diǎn)擊次數(shù):542次
AChRAb試劑盒中通常有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶聯(lián)系物,加底物。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在ELISA試劑盒板孔的底部,避免加在孔壁上部,并留意不行濺起,不行產(chǎn)生氣泡。加標(biāo)本通常用微量加樣器,按規(guī)則的量參加板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴,避免發(fā)作交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。試劑盒的選擇:
◎試劑應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡(jiǎn)便性、安全性及經(jīng)濟(jì)性全面評(píng)價(jià)。
◎特異性:常用交叉反應(yīng)率表示。含有與待測(cè)物相近結(jié)構(gòu)部份的物質(zhì)可能存在交叉反應(yīng),使測(cè)定結(jié)果升高,可能導(dǎo)致假陽(yáng)性,所以交叉反應(yīng)是評(píng)價(jià)其質(zhì)量的關(guān)鍵指標(biāo)。
◎精密度:ELISA試劑一般指其批內(nèi)CV%,其值應(yīng)小于15%;定量試劑應(yīng)同時(shí)考察線性范圍。
◎準(zhǔn)確度:通過(guò)添加回收實(shí)驗(yàn)進(jìn)行評(píng)價(jià)。
◎簡(jiǎn)便性:指在不影響試劑的前三項(xiàng)指標(biāo)的前題下,實(shí)驗(yàn)和測(cè)定步驟越少越好,在定性實(shí)驗(yàn)中結(jié)果判斷簡(jiǎn)單明了,定量試驗(yàn)結(jié)果計(jì)算也應(yīng)簡(jiǎn)單。
◎安全性:指試劑對(duì)操作者和環(huán)境安全無(wú)害無(wú)傳染性。
◎經(jīng)濟(jì)性:試劑在同等質(zhì)量條件下通過(guò)大規(guī)模生產(chǎn)或技術(shù)進(jìn)步降低成本,而市場(chǎng)價(jià)格比較合理。
◎試劑評(píng)價(jià):需要有的確證方法和確證的樣品進(jìn)行檢測(cè)。
AChRAb試劑盒操作時(shí)注意事項(xiàng):
1.不同廠家生產(chǎn)的試劑盒因生產(chǎn)工藝和操作方法略有不同,務(wù)必按照所用AChRab試劑盒廠家供應(yīng)/量大從優(yōu)嚴(yán)格操作,否則容易產(chǎn)生檢測(cè)結(jié)果的不確定性.
2.若不同批號(hào)ELISA試劑盒的不同組分(A液或酶工作液),或不同試劑的不同組分進(jìn)行交叉使用,有可能出現(xiàn)顯色淺或本底高,花板等情形。
3.反應(yīng)時(shí)間的誤差,做大量標(biāo)本時(shí),孔和后一孔以及一些特殊標(biāo)本可能影響較大。
4.臨界值附近標(biāo)本波動(dòng)為正?,F(xiàn)象,任何試劑均不可避免。可以考慮將標(biāo)本做奇數(shù)次復(fù)檢。
5.加樣時(shí)樣品量誤差,對(duì)于陰或很陽(yáng)的標(biāo)本影響不大,但對(duì)閾值附近的標(biāo)本影響較大,建議校對(duì)加樣器。