胰島細(xì)胞抗體ELISA試劑盒如何避免血清沉淀物的產(chǎn)生
更新時(shí)間:2018-12-21 點(diǎn)擊次數(shù):946次
胰島細(xì)胞抗體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理:
胰島細(xì)胞抗體ELISA試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心酶標(biāo)免疫分析法測定標(biāo)本中CCK水平。用純化的抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入CCK抗原、生物素化的抗人CCK抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。顏色的深淺和樣品中的CCK呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在827nm波長下測定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。
胰島細(xì)胞抗體ELISA試劑盒組成結(jié)構(gòu):
1、血清:操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2、血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
5、保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
胰島細(xì)胞抗體ELISA試劑盒廠家為您講解避免血清沉淀物產(chǎn)生的五個小方法:
A、解凍血清時(shí),隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一。
B、若必須做血清的熱滅活,請遵守56攝氏度,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。
C、請勿將血清置于37攝氏度太久,會變得混濁。
D、血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。
E、解凍血清時(shí),請按照所建議的逐步解凍法。
胰島細(xì)胞抗體ELISA試劑盒檢測范圍:
人、綿羊、小鼠、大鼠、豬、兔、山羊、牛、馬、豬、其它動物細(xì)胞因子、植物細(xì)胞因子、骨代謝、細(xì)胞凋亡、激素內(nèi)分泌、活性多肽、肝纖維化、自身抗體、血栓與止血、腫瘤、自身抗體科研Elisa檢測試劑盒。