ICA ELISA試劑盒技術原理
更新時間:2017-08-16 點擊次數(shù):1094次
ICA ELISA試劑盒采用雙抗原夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA)測定標本中胰島細胞抗體(ICA)。用純化的胰島細胞抗體(ICA)抗原包被微孔板,制成固相抗原,可與樣品中胰島細胞抗體(ICA)相結合,經洗滌除去未結合的抗體和其他成分后再與HRP標記的胰島細胞抗體(ICA)抗原結合,形成抗原-抗體-酶標抗原復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標本中胰島細胞抗體(ICA)的存在與否。
ICA ELISA試劑盒技術原理:
(1). 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
(2). 結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。
(3). 酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。
(4). 受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。
(5). 此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復性好。以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術
ICA ELISA試劑盒為防止變化,維持標準化現(xiàn)狀的管理過程,稱為防止誤差,也就是我們常說的質量控制。在酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)中,能分離簡化實驗步驟,大大提高了靈敏度。適用實驗方法包括間接法、夾心法及競爭法等等。